引言 朊病毒是一类可传播的病原体，能够引起人类和动物脑部蛋白质的异常折叠，导致严重的脑损伤，通常是致命的。这类神经退行性疾病的例子包括羊瘙痒症、疯牛病（牛海绵状脑病）和克雅氏病。传统研究朊病毒的方法需要对受感染动物进行长达1到6个月的长时间生物测定，不仅耗时长，而且成本高昂。蒙大拿州汉密尔顿的落基山实验室开展了一项研究，开发了实时震荡诱导转化测定法（RT-QuIC），用于对感染样本中的朊病毒水平进行快速的终点定量测量。与传统方法相比，这种检测方式显著提高了速度和通量，能够在20小时内完成，并且灵敏度不亚于甚至高于全动物模型。
检测原理 RT-QuIC检测法通过连续稀释样本，估算朊病毒接种的相对数量。该方法涉及将微量的传染性朊病毒添加到正常的朊病毒蛋白中，引发朊病毒蛋白发生相似于疾病的错误折叠。通过测量样本的稀释度，量化接种活性损失（SD），确定接种剂量（SD50）。
实验步骤 在整个20至68小时的实验中，仪器设置为在42°C下恒温孵育。我们编写了两个测试协议的脚本：第一个协议是振荡一分钟，然后静置一分钟；第二个协议是每15分钟使用底部光学镜进行荧光终点测量。荧光染料硫黄素T（ThT）被用作朊病毒接种的标记，在聚合反应中与朊病毒蛋白结合，从而导致荧光强度随时间增加。
结果与讨论 通过使用软件脚本对RT-QuIC检测进行20至68小时的测量，数据来源为8个重复孔的相对荧光单位平均值。RT-QuIC的结果与生物测定结果高度相关，这表明该检测方法比传统的动物生物检测更快速和高通量。进一步分析显示，接种后85天的样本显示的SD50/克组织（10E12）高于接种后10天的样本（10E82），这与预期结果一致。
结论 利用多功能酶标仪与RT-QuIC检测法，能够更快速、高效地测量朊病毒接种。已经证明可通过RT-QuIC检测的一些传染性海绵状脑病包括仓鼠和绵羊的痒病、鹿的慢性消耗性疾病以及克雅氏病（CJD）和牛海绵状脑病（BSE）。相比传统的生物检测方法，RT-QuIC具有更快和更灵敏的优点。尊龙凯时的Omega系列酶标仪提供强大的功能和耐用的质量，能够支撑这种检测所需的连续多日高速震动，为生物医药研究提供可靠保障。