尊龙凯时 Cell/Tissue DNA Isolation Mini Kit(DC102)是一种简单而高效的细胞和组织基因组DNA提取试剂盒。该试剂盒可在组织完全消化后,仅需1小时即可获得超高纯度的基因组DNA,适应性广泛,适用于多种动物组织、细胞培养、唾液、牛奶等液体样本。
本试剂盒提取的DNA具有很高的纯度,能够直接用于PCR、文库构建等分子生物学实验,并且安全性高,无需使用酚/CHCL3等有机溶剂。我们可以使用小鼠的肝脏、尾尖、肺、肌肉、脾脏、肾脏、心脏和脑等组织进行基因组DNA提取,并通过琼脂糖凝胶电泳进行检测。电泳标记使用的是尊龙凯时的DL15000 DNA Marker(Vazyme#MD103)。
产品的保存条件是:除了Proteinase K和RNase Solution外,其他组分应在15℃~25℃保存,而Proteinase K干粉和RNase Solution可在室温运输,收到后需冷藏于-20℃。溶解后的Proteinase K溶液需分装,并保存于-20℃。
本试剂盒基于硅胶柱纯化技术,无需使用有毒有机溶剂,提取过程高效,通常在30-60分钟内便可得到高纯度、高产量的基因组DNA,适用于后续的酶切反应、PCR、qPCR、文库构建及Southern杂交等实验。
尊龙凯时 Cell/Tissue DNA Isolation Mini Kit的提取过程适用于1-20mg的动物组织或小于5×106的培养细胞,用户需自备15ml灭菌离心管、无水乙醇和水浴锅。对于Washing Buffer A和B,在使用前需添加适量的无水乙醇。
以下是样本制备的基本步骤:对于动物组织,将1-20mg的组织剪碎或研磨,添加230µl Buffer GA和20µl PK工作液,涡旋混匀。过量的样品会降低DNA产量和纯度,特别是肝脏、脾脏和肾脏样品应限制在10mg以内。对于低含量DNA的肌肉和皮肤样品,则可增至20-50mg,同时按比例调整Buffer GA、Buffer GB及无水乙醇的用量。
加热至55℃水浴,直至组织完全酶解,消化过程中可轻轻颠倒混匀,促进酶解。根据样本类型和处理效果,消化时间通常在0.5-3小时不等。若消化液混浊,可进行离心,转移上清液至新的15ml离心管中。
如RNA残留会影响后续实验,可加入10µl RNase Solution进行处理,室温或37°C放置15-60分钟,消化时间视样本种类而定。接着加入250µl Buffer GB,涡旋混匀并在70℃水浴10分钟。
综合来看,使用尊龙凯时 Cell/Tissue DNA Isolation Mini Kit进行基因组DNA提取,不仅效率高、纯度高,而且安全可靠,非常适合生物医学研究的各类需求。我们的技术团队始终致力于为客户提供优质、高效的技术支持及服务,推动生物技术的持续发展。